برای ساخت و راه اندازی آزمایشگاه پاتولوژی علاوه بر سرمایه ، کارکنان زحمت کش ، مجوز ؛ به تجهیزات پزشکی هم نیاز دارید. در این مقاله سعی کرده ایم نام دستگاه ،علت نیاز به دستگاه و مراحل انجام آزمایش را شرح دهیم.
1-تیشو پروسسور (پردازشگر بافت)
پردازش بافت چیست؟ پردازش بافت روشی برای حذف آب از سلول ها و جایگزینی آن با محیطی است که باعث می شود مقاطع نازک بر روی میکروتوم بریده شوند. پردازش بافت به طور معمول بر روی ابزاری به نام Tissue Processor انجام می شود.
بافتهایی که از بدن برای تشخیص فرایندهای بیماری گرفته شده است ، توسط پردازشگر بافت (Tissue processor) در آزمایشگاه بافت شناسی، پردازش می شود. فرایند پردازش بافت ها قبل از میکروتومی انجام می شود تا اسلایدهای میکروسکوپی تولید شده توسط آسیب شناسان در زیر میکروسکوپ مشاهده شود.
رایانه کنترل جریان پردازش از طریق پردازشگر بافت (Tissue processor) برای انجام خودکار تثبیت ، آبگیری ، پاکسازی و اشباع پارافین از بافت را بر عهده دارد .هنگام پردازش، معرف ها و پارافین مذاب در یک توالی برنامه ریزی شده و نمونه ها باید در یک محفظه کاملاً بسته ثابت بمانند.
هنگامی که بافت به درستی ثابت شد ، فرایندی را طی می کند که شامل مراحل زیر است:
1- آبگیری:
از آنجا که پارافین آبگریز است، قبل از نفوذ با پارافین ، باید آب داخل یک نمونه را خارج کرد. این فرایند با غوطه وری نمونه ها در یک سری الکل انجام می شود.
الکل به تدریج جایگزین آب در تمام سلولهای نمونه می شود.
برای جلوگیری از بین رفتن بیش از حد بافت ، از یک سری غلظت های الکلی در حال افزایش (به طور معمول از ۷۰٪ به ۱۰۰٪) استفاده می شود.
2- پاکسازی:
از آنجا که الکل ها و پارافین ها قابل اختلاط نیستند ، باید از یک حلال واسطه ای که کاملاً با هر دو ترکیب می شود (مانند زایلن) استفاده شود .این حلال، الکل موجود در بافت را از طریق فرایند “پاکسازی” جابجا می کند.
“پاکسازی” مربوط به این است که عوامل پاک کننده به دلیل ضریب شکست نسبتاً بالا ، یک شفافیت نوری یا شفافیت را به بافت منتقل می کنند.
نقش مهم دیگر عامل پاکسازی حذف مقدار قابل توجهی چربی از بافت است که در غیر این صورت مانعی برای نفوذ پارافین است.
برای اطمینان از اینکه تمام آثار الکل از بافت های در حال پردازش برداشته می شود ، تغییرات متعدد زایلن تازه ، پاک از الکل حمل شده ، لازم است.
3– نفوذ:
اکنون پارافین می تواند به نمونه نفوذ کند. پارافین مذاب به بافت ها نفوذ می کند و هنگامی که خنک می شود ، سخت شده و اجازه می دهد که بافت به راحتی بر روی میکروتوم برشگیری شود.
2- تیشو امبدینگ:
تیشو امبدینگ یک تکنیک برای قرار دادن سلول ها یا بافت ها در یک محیط نگهدارنده است. به طوری که بتوان آنها را به اسلاید های نازک به وسیله میکروتوم برش داد . محیط میتواند موم پارافین (پارافین امبدینگ ؛ این روش معمول تر است) یا (پلاستیک : پلاستیک امبدینگ) مانند رزین های اپوکسی باشد.
برای جاسازی پارافین در دستگاه تیشو امبدینگ از پارافین دیسپنسر و هات پلیت (برای شکل دادن) پارافین ذوب کن (جهت ذوب ان) استفاده میشود استفاده میشود. پارافین ذوب کن و مخزن ان برای ذوب پارافین و نگهداری آن است تا پارافین حالت مایع بگیرد و در دستگاه قالب ساز جایگذاری شود.
3- کولد پلیت (صفحه سرد کننده):
بافت های قرار داده شده در قالب های پارافین گرم بر روی صفحه سرد کننده قرار میگیرند تا سفت شوند و بتوان آنها را توسط میکروتوم برش داد.
4- میکروتوم:
میکروتوم به عنوان ابزاری برای ایجاد برش خیلی نازک از تکههای مواد استفاده میشود که “مقطع” نامیده میشود. این دستگاه به عنوان یک ابزار مهم در میکروسکوپی، برای آمادهسازی نمونهها جهت مشاهده زیر نور عبوری یا پرتوهای الکترون استفاده میشود. میکروتومی روشی برای آمادهسازی مقاطع نازک از موادی مانند استخوان، مواد معدنی و دندان و نیز یک گزینه برای الکتروپولیش و فرز یونی میباشد. مقاطع میکروتوم میتوانند به قدری نازک ساخته شوند که یک تار موی انسان را در سرتاسر عرض آن با ضخامت بین 50 نانومتر تا 100 میکرومتر برش دهند. با استفاده از این دستگاه در آزمایشگاه پاتولوژی قالب های پارافین را به لایه های بسیار نازک تبدیل میکنند تا در زیر میکروسکوپ قرار گیرند.
5- تیشو فلوت بث (حمام شناور سازی بافت):
برخی از لایه های برش خورده قالب های بافت چروک میشوند. از تیشو فلوت (حمام شناور سازی بافت) برای از بین بردن چین و چروک ایجاد شده بر روی برش های پارافینی بافت پس از تهیه برش بلوک پارافینی بافت توسط میکروتوم در هیستولوژی یا پاتولوژی استفاده می شود. پس از این که برش های بافت توسط میکروتوم تهیه شد، این برش ها بر روی سطح آب گرم شناور می شوند به این ترتیب چین و چروک برش های بافت به واسطه باز و پهن شدن برش ها روی سطح آب و دمای آب از بین می روند. همچنین گرمای آب باعث می شود تا پارافین به اسلاید های شیشه ای بچسبد و مشاهده راحت تر شود.
6-تیشو اسلاید استینر (دستگاه رنگ آمیزی بافت اتوماتیک)
سلول ها و بافت های برش خورده به خودی خود رنگ مشخصی ندارند و مشاهده و تشخیص آنها دشوار است. به همین دلیل برای قابل مشاهده بودن انها را رنگی میکنند. دستگاه رنگ آمیزی بافت اتوماتیک tissue slide stainer روش وقت گیر و کسل کننده رنگ آمیزی مقاطع دستی را مرتفع نموده و با استاندارد کردن روند های رنگ آمیزی وسایل خودکار میتوانند کیفیت و ثبات نتایج را بهبود بخشند. از این دستگاه به طور گسترده در مراکز پاتولوژی و علمی و تحقیقاتی و صنایع غذایی و دارویی استفاده میگردد.
